反相鍵合相色譜儀色譜柱的選擇要求包括選擇性合適、色譜峰形良好、重現(xiàn)性好和應(yīng)用范圍寬等。
一、選擇性合適:
滿足不同的分離要求。
由于硅羥基的影響,許多情況下硅膠基質(zhì)對(duì)整個(gè)鍵合相的性能起決定作用。內(nèi)嵌極性基團(tuán)鍵合相在使用高比例水溶液流動(dòng)相時(shí),色譜性能穩(wěn)定。
二、色譜峰形良好:
滿足定量精度、靈敏度和分離度要求。
1、定量結(jié)果更準(zhǔn)確、更精確:
(1)純度分析。
(2)穩(wěn)定性分析。
2、靈敏度更高:
檢測(cè)下限更低,對(duì)低濃度雜質(zhì)有更強(qiáng)的檢測(cè)能力。
3、分離度更好:
更有利于相鄰色譜峰的分離。
三、重現(xiàn)性好:
重現(xiàn)性是液相色譜分析的基本要求。
1、色譜柱間重現(xiàn)性:
指同一批次合成的填料之間的重現(xiàn)性。
(1)柱床填充質(zhì)量控制:
1)理論塔板數(shù)。
2)色譜峰對(duì)稱(chēng)。
3)柱反壓。
(2)無(wú)選擇性差異。
2、色譜柱批次間重現(xiàn)性:
指不同批次合成的填料之間的重現(xiàn)性。
(1)顆粒的物理性質(zhì)。
(2)顆粒表面的化學(xué)性質(zhì)。
四、應(yīng)用范圍寬:
1、pH值范圍寬:
(1)pH>8時(shí),許多C18硅膠基質(zhì)由于填料顆粒溶解,色譜柱內(nèi)產(chǎn)生空隙,會(huì)過(guò)早地失去柱效。隨著鍵合相覆蓋率的增加,色譜柱壽命會(huì)延長(zhǎng)。
(2)pH<2時(shí),許多C18硅膠基質(zhì)由于鍵合相的水解作用,會(huì)過(guò)早地失去柱效。使用三官能團(tuán)鍵合相可獲得最佳穩(wěn)定性。
2、高溫穩(wěn)定性。